Chromatographie des pigments d'une feuille - Protocole

Matériel

• Une solution de chlorophylle brute.
  
• Du papier à chromatographie (papier Whatman).
  
• Un agitateur en verre.
  
• Une cuve à chromatographie contenant environ 1 cm d'éluant (contient des solvants organiques) et recouverte d'un cache opaque
  
• Une hotte de laboratoire.
  

ATTENTION ! L'éluant dégage des vapeurs toxiques. Toute manipulation de la cuve à chromatographie doit se faire sous la hotte qui permet d'extraire et de filtrer les vapeurs toxiques.

Étapes

1. Sur une bande de papier à chromatographie, tracer un trait à 2 cm du bas au crayon à papier.

2. Déposer au niveau de ce trait une goutte de la solution de chlorophylle brute.

3. Laisser sécher quelques instants et répéter l'opération 2 à 3 fois.

4. Suspendre le papier dans la cuve à chromatographie et vérifier que la bande de papier trempe dans l'éluant mais que le dépôt de chlorophylle brute se situe bien au-dessus du niveau de l'éluant.

5. Recouvrir la cuve à chromatographie d'un cache opaque et attendre environ 30 minutes.

L'éluant monte par capillarité dans la bande de papier à chromatographie et entraîne les différents pigments dans les solvants organiques. Ils se séparent progressivement en fonction de leur vitesse de migration.

Aide pour l'identification des pigments de la feuille

Les pigments qui migrent le moins loin sont la chlorophylle b (vert clair) et la chlorophylle a (vert foncé), puis les xanthophylles (jaune) et enfin le plus loin les carotènes (orange).